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학술기사

Optimized transformation of Streptomyces sp. ATCC 39366 producing leptomycin by electroporation

표제/저자사항
Optimized transformation of Streptomyces sp. ATCC 39366 producing leptomycin by electroporation / Yong-Qiang Fan, Hong-Jian Liu, Li Yan, Yu-Shi Luan, Hai-Meng Zhou, Jun-Mo Yang, Shang-Jun Yin, Yu-Long Wang
형태사항
p. 318-322 ; 29 cm
주기사항
수록자료: The Journal of microbiology. The Microbiological Society of Korea(MSK). Vol.51 no.3(2013 June), p. 318-322 51:3<318 ISSN 1225-8873
저자: Yong-Qiang Fan, School of Life Science and Biotechnology, Dalian University of Technology
저자: Hong-Jian Liu, School of Life Science and Biotechnology, Dalian University of Technology
저자: Li Yan, Zhejiang Provincial Key Laboratory of Applied Enzymology, Yangtze Delta Region Institute of Tsinghua University
저자: Yu-Shi Luan, School of Life Science and Biotechnology, Dalian University of Technology
저자: Hai-Meng Zhou, Zhejiang Provincial Key Laboratory of Applied Enzymology, Yangtze Delta Region Institute of Tsinghua University
저자: Jun-Mo Yang, Department of Dermatology, Sungkyunkwan University School of Medicine, Samsung Medical Center
저자: Shang-Jun Yin, College of Biological and Environmental Sciences, Zhejiang Wanli University E-MAIL: yinshangjun@163.com
저자: Yu-Long Wang, Zhejiang Provincial Key Laboratory of Applied Enzymology, Yangtze Delta Region Institute of Tsinghua University E-MAIL: ylwang2001@yahoo.com.cn
수록잡지명
The Journal of microbiology.
청구기호
579-J86-51(3)
자료이용하는곳
3층 연속간행물실(서고자료대출반납)(보존)
자료 이용 방법
학술기사선택 => 바구니넣기 => 자료당일신청 후 [3층 연속간행물실(서고자료대출반납)(보존)] 에서 이용하십시오

초록내용/해제내용

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 Streptomyces sp. ATCC 39366 produces leptomycin derivatives. Leptomycin B, a potent and specific inhibitor against the export of nuclear proteins, is the main product; however, the introduction of DNA into this strain is almost impossible, which has impeded its further use. We developed a Streptomyces sp. ATCC 39366 transformation protocol to introduce foreign DNA via electroporation. Various conditions were examined, including treatments of the cell wall with weakening agents, electroporation parameters, and DNA content. We found that only plasmid DNA isolated from a dam ET12567 strain resulted in successful transformation. The mycelium growing in a yeast-peptone-dextrose medium supplemented with 1% glycine at 28°C on a rotary shaker (220 rpm) was more dispersed than those without supplementation and prone to electroporation. The maximum transformation efficiency of 8×10² CFU/μg plasmid DNA was obtained at a field strength of 13 kV/cm with a time constant of 13 ms (25-μF capacitor; parallel resistance, 600 Ω) using 1-mm electrocuvettes. The results of the transformations of two other Streptomyces species indicated that the optimized conditions established in this study might only be applicable to Streptomyces sp. ATCC 39366. However, this is the first report of successful transformation of Streptomyces sp. ATCC 39366, and will facilitate the construction of a gene knockout mutant in Streptomyces sp. ATCC 39366 to produce series of new leptomycin derivatives.


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